Técnicas moleculares
Huellas Digitales Genéticas o DNA – fingerprinting (Perfil de DNA)
A pesar que el 99,9% de las secuencias de DNA humano son iguales en toda nuestra especie, hay suficiente cantidad de DNA diferente para distinguir un individuo de otro, excepto en gemelos univitelinos. El perfil de DNA utiliza secuencias repetitivas que se encuentra a lo largo de nuestro genoma, las cuales son altamente variables, llamadas con el acrónimo VNTRs del inglés Variable Number Tandem Repeats, o lo que es lo mismo, Repeticiones en Tándem en Número Variable, STRs o Short Tandem Repeats (Repeticiones en tándem cortas). Los loci de VNTRs son muy similares entre personas emparentadas, pero muy variables entre personas no relacionadas. Tanto es así, que es extremadamente improbable tener el mismo VNTRs, con lo cual es muy útil a la hora de individualizar muestras.
Esta técnica se usó por primera vez en 1984 por Sir Alec Jeffreys en la Universidad de Leicester, Inglaterra. Actualmente es la base de la mayoría de bases de datos nacionales de DNA. Jeffreys comercializó su idea en 1987.
El esquema básico de cómo se lleva a cabo esta técnica se muestra en la figura 1. A partir de aquí, con una serie de variaciones obtenemos el resto de técnicas que se utilizan en la práctica forense.
Figura 1.
1. El proceso empieza a partir de una muestra biológica, por ejemplo, saliva, semen o sangre, de la cual queremos determinar su DNA. 2. Tomando como ejemplo una muestra de sangre, separamos las células sanguíneas nucleadas, de las cuales se extrae el DNA que se encuentra en el interior del núcleo de éstas. 3. Este DNA se corta en fragmentos más pequeños, ya que la molécula de DNA es una molécula muy grande. Para ello, se utilizan enzimas de restricción. 4. Una vez conseguidos los fragmentos, se separan mediante electroforesis en un gel de agarosa. 5. El patrón de bandas que obtenemos de la electroforesis se transfiere a una membrana de nylon. 6. Se introduce una sonda de DNA radioactivo (DNA conocido y tratado previamente). Estas sondas se unen a secuencias específicas de las bandas que tenemos en la membrana de nylon. Como son radioactivas, nos permitirán ver el DNA problema una vez revelado. 7. El exceso de sondas se elimina mediante un lavado, dejando un patrón de bandas único. 8. El patrón de DNA radioactivo se transfiere a una película de rayos X por exposición directa. Cuando acaba este proceso, el patrón visible resultante es la llamada Huella Digital Genética o DNA-fingerprint.